فـرمت: DOC
تعداد صفحات: 250 صفحه
رشتــه : دامپزشکی

بصورت کامل ، مرتب ، قابل ویرایش و آماده چاپ میباشد.

توضیحات:

فهرست

عنوان صفحه

الف- مقدمه………………………………………. 1

ب-چکيده…………………………………………. 3

فصل اول:کليات …………………………………… 5                                                                                                                   

1- تاريخچه    …………………………………… 6                                                                                                              

2- خصوصيات کلي مايکوپلاسما…………………………. 6

3- مقاومت مايکوپلاسماها…………………………… 8

4- طبقه بندي مايکوپلاسماها………………………… 9

5- طبقه بندي کلاستر مايکوئيدس……………………… 12

6- فيلوژني……………………………………… . 14

7- ساختمان  ……………………………………. 15

1-7-ساختمان مايکوپلاسما مايکوئيدس …………………… 15

2-7- ساختمان مايکوپلاسما کاپري کولوم ………………. 17

8- بيولوژي مولکولي………………………………. 19

9- توالي‌هاي تکراري………………………………. 23

10- پروتئينهاي سطحي……………………………… 25

11- فاکتور حدت………………………………….. 30

12- آناليز پروتئين  …………………………….. 32

13- طبقه بندي سويه‌ها ……………………………. 34

14- مشخصات گونه مايکوئيدس………………………… 35

15- کشت و رشد گونه مايکوئيدس …………………….. 38

16- کشت و رشد گونه کاپري کولوم …………………… 41

1-16- محيط Thiacourt  …………………………….. 41

17- بيماري پلوروپنوموني واگير گاوان……………….. 44

1-17- علائم باليني ………………………………. 45                                      

2-17- علائم کالبدگشايي بيماري …………………….. 47

3-17- پاتوژنز ………………………………….. 50

1-3-17- مکانيسمهاي مقابله با دستگاه ايمني………….. 53

4-17- اختصاصيت ميزبان……………………………. 57

5-17- انتقال بيماري  ……………………………. 58

6-17- سير همه گيري ………………………………. 59

1-6-17- مخزن……………………………………. 59   

2-6-17- راه انتقال………………………………. 59

7-17- پيشگيري و کنترل……………………………. 60

1-7-17- اقدامات لازم براي حفاظت مناطق عاري از بيماري…. 61

2-7-17- اقدامات لازم هنگام شيوع بيماري……………… 62

3-7-17- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومي……………. 63

18- بيماري پلوروپنوموني واگير بزان ……………….. 63

1-18- علائم باليني ………………………………. 64

2-18- علائم کالبد گشايي…………………………… 66

19- گونه مايکوپلاسما کاپريکولوم کاپريکولوم………….. 69

1-19- سندروم MASKePs…………………………….. 70

2-19- علائم باليني……………………………….. 71

3-19- علائم کالبد گشايي…………………………… 71

4-19- سندروم آگالاکتيه واگير………………………. 73  

20- گونه مايکوپلاسما کاپري ……………………….. 73 

1-20- بيماريزايي ……………………………….. 73

2-20- علائم کالبد گشايي…………………………… 74

21- سير همه‌گيري…………………………………  75

1-21-مخزن……………………………………… ..  75

2-21-راه انتقال…………………………………   76

3-21-جمعيت ميزبان……………………………….  77

22-پيشگيري وکنترل ………………………………    77

1-22- اقدامات لازم براي محافظت مناطق عاري از بيماري….   77

2-22- اقدامات لازم هنگام شيوع بيماري……………….  78

3-22- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومي……………..  78

23-واکسن………………………………………….  79

1-23-واکسن MmmLC ……………………………..    79

2-23-واکسن Mccp ………………………………..   79

3-23-واکسن Mcc  ………………………………..  79 79-اختصاصيت ميزبان در کلاستر مايکوئيدس  ………………         80

25-تشخيص افتراقي……………………………….. 80

1-25-شناسايي عامل بيماري زا …………………….. ..      81

1-1-25-بررسي ميکروسکوپيک اگزوداي ريه از طريق تهيه اسمير يا برش بافتي    81

2-25- تشخيص آزمايشگاهي ………………………….  81

1-2-25- روش کشت و جداسازي……………………….. 81

1-1-2-25- انتخاب نمونه ها ………………………….  82

2-1-2-25- آماده سازي نمونه ها ……………………    82

3-25- تستهاي بيوشيمي……………………………. 83

4-25- روشهاي سرولوژي……………………………. 85

1-4-25- عوامل موثر در آزمايشات سرولوژي ………………      85

2-4-25- تست مهاري رشد  …………………………….  87

3-4-25- تست ايمونو فلورسانس ………………………..  88

4-4-25- تست رسوب ژلي……………………………. .. 88

5-4-25- تست فيکساسيون کامپلمان ……………………..  89

6-4-25- تست ممانعت از هماگلوتيناسيون ………………..  89

7-4-25- تست آگلوتيناسيون لاتکس……………………. 90

8-4-25- تست اليزاي رقابتي……………………….. 91

9-4-25- ساير تستهاي تشخيصي………………………. 94

5-25 – مشکلات روشهاي سنتي………………………… 94

6-25- تشخيص با استفاده از PCR…………………… 95

فصل دوم: روش کار

26- روش کار …………………………………… 101

1-26- جمع آوري نمونه ……………………………… 101

1-1-26- مواد لازم………………………………….. 101

2-1-26- بخش جمع آوري نمونه………………………. 101

3-1-26- نمونه برداري …………………………… 103

2-26- کشت و جداسازي نمونه ها…………………….. 104

1-2-26- مواد لازم ………………………………. 104

2-2-26- طرز تهيه محيط کشت اختصاصي براي جداسازي مايکوپلاسماي نشخوار کنندگان …………………………………………. 106

1-2-2-26- مواد لازم …………………………….. 106

2-2-2-26- روش تهيه محيط کشت………………………… 107

3-26- استخراج DNA مايکوپلاسما……………………. 109

1-3-26- روش استخراج DNA از نمونه هاي ارسالي…………. 109

4-26- فرايند PCR ……………………………… 110

1-4-26- مواد لازم ………………………………. 110

2-4-26- آماده سازي مواد جهت واکنش PCR ……………… 112

1-2-4-26- افزوده سازي DNA نمونه‌ها ………………. 112

2-2-4-26- افزوده سازي DNA کلونيهاي جدا شده……….. 115

3-2-4-26- تهيه مخلوط اصلي اوليه………………….. 115

3-4-26- پرايمرها……………………………….. 115

4-26- واکنش PCR……………………………….. 117

5-26- تهيه ژل الکتروفورز ……………………….. 118 

1-5-26- طرز تهيه محلول اتيديوم برمايد ………………. 119

6-26- الکتروفورز …………………………………. 121

7-26- رويت باندهاي ايجاد شده ……………………. 122

فصل سوم: نتايج

27- نتايج …………………………………….. .. 124

1-27- جداسازي………………………………….. 124

1-1-27- بررسي عملکرد محيط کشت……………………. 124

2-1-27- نتايج کشت نمونه هاي ارسالي ………………. 124

1-2-1-27- نتايج روز پنجم  ………………………. 125

2-2-1-27- نتايج روزهفتم تا دهم…………………… 125

3-2-1-27- نتايج روزپانزدهم………………………. 126

2-27- نتايج  PCR  ……………………………….. 126

1-2-27- نتايج  PCR نمونه ها با پرايمر جنس ……….. 126

2-2-27- تائيد کلوني هاي جدا شده………………….. 127

3-2-27- نتايج  PCR نمونه ها با پرايمر کلاستر مايکوئيدس 127

4-2-27- نتايج  PCR نمونه ها با پرايمر گونه آگالاکتيه.. 128

5-2-27- نتايج  PCR نمونه ها با پرايمر گونه مايکوئيدس کلوني بزرگ        129

3-27- نتايج کالبد گشايي…………………………. 130

1-3-27- معيار انتخاب …………………………… 130

فصل چهارم: بررسي نتايج

نمودارها…………………………………………. 131

فصل پنجم: بحث

28- بحث …………………………………………. 139  

1-28- ضايعات کالبد گشايي…………………………… 139

2-28- ميزان وقوع عفونت تنفسي مايکوپلاسما ………….. 141

3-28- روش کشت………………………………….. 142

4-28- روش  PCR  ……………………………….. 147     

5-28- فراواني گونه ها ………………………….. 152

29- خلاصه انگليسي……………………………….. 159

30- منابع …………………………………….. .. 160

فهرست تصاوير

تصوير شماره 1: کلوني تخم مرغي شکل مايکوپلاسما پس از سومين ساب کالچر 125

تصوير شماره 2:  آزمايش  PCR براي تشخيص جنس مايکوپلاسما در نمونه ريه   127

تصوير شماره 3: آزمايش PCR  براي تشخيص کلاستر مايکوئيدس در نمونه ريه         128 

تصوير شماره 4: آزمايش PCR براي تشخيص گونه آگالاکتيه درنمونه ريه           ………………..          129

تصوير شماره 5: آزمايش PCR براي تشخيص گونه مايکوئيدس مايکوئيدس کلوني بزرگ    130

فهرست جداول

عنوان  ………………………………………………………………………………………………………….. صفحه 

جدول1:  طبقه بندي مايکوپلاسما………………………..   11

جدول  2: معرفي اعضا کلاستر مايکوئيدس و خصوصيات بيماريزايي آنها   11

جدول 3: احتياجات غذايي براي رشد مايکوپلاسماهاي کلاستر مايکوئيدس 39

جدول 4 : مقادير موردنياز جهت تهيه مخلوط اصلي اوليه…. 112

جدول 5: مواد مورد نياز واکنش تکثير ………………. 114

جدول6 : پرايمرهاي استفاده شده در واکنش تکثير ……… 116

جدول 7 : برنامه واکنش پرايمرها …………………..  118

جدول8: : فرمول تهيه محيط  TBE(5X)…………………. 120

جدول9: ميزان اتيديوم برومايد مصرفي جهت ساختن مقادير متفاوت ژل 120

فهرست نمودارها

عنوان …………………………………………………………………………………………………………………….             صفحه

نمودار شماره 1: درصد مايکوپلاسماي جدا شده به روش کشت در عفونت تنفسي

گله‌هاي مورد مطالعه…………………………….          132

 نمودارشماره 2: درصد حضور مايکوپلاسما درعفونت تنفسي گله‌هاي مورد

مطالعه به روشPCR …………………………….. 132

نمودار شماره3 : مقايسه روشهاي کشت و PCR در تشخيص  مايکوپلاسما ي موجود در عفونت تنفسي گله‌هاي مورد مطالعه………………. 133

نمودار شماره4: مقايسه نتايج کشت وPCR  نمونه‌ها در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) 133 

نمودار شماره 5: مقايسه نتايج کشت و PCR مايکوپلاسما در گاو  (n=50)    134

نمودار شماره 6: مقايسه  نتايج کشت و PCR مايکوپلاسما در گله هاي  گوسفند (n=30)  134

نمودار شماره 7: مقايسه نتايج کشت و PCR در گله‌هاي بز (n=20)     135

نمودار شماره8: نمودار شماره 8:مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR  مايکوپلاسما در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) ……  135

نمودار شماره 9: نمودار شماره9:مقايسه نتايج ايجاد کدورت در محيط براث و جداسازي مايکوپلاسما در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) ….  136

نمودار شماره 10: نمودار شماره10: مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR   مايکوپلاسما
در گله‌هاي گاو(n=50)……………………………. 136

نمودار شماره 11: نمودار شماره 11:مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR  مايکوپلاسما
در گله‌هاي بز (n=20)……………………………. 137

نمودار شماره12: مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي گوسفند (n=30) ………………………. 137

» ايميل خود را صحيح وارد كنيد. بعد از پرداخت موفق ، لينك دانلود به ايميل شما ارسال خواهد شد .
» بعد از درج ايميل بر روي گزينه "خريد آنلاين محصول" كليك كنيد تا به صفحه پرداخت آنلاين منتقل شويد .
» درج شماره تلفن همراه در مواقع لزوم فرآیند پیگیری خرید را ساده تر می کند .